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動物行為實驗方法硬核總結:懸尾實驗(Tail suspension test, TST)

一、實驗原理


懸尾實驗(Tail suspension test, TST)是一種經典而又能快速評價抗抑郁藥wu、興奮藥wu、鎮jing藥wu藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫,從而放棄掙扎,進入特有的抑郁不動狀態,實驗過程中記錄動物不動時間來反映抑郁狀態,抗抑郁藥wu、興奮藥wu能明顯地縮短改變其狀態。

將實驗動物的尾部進行固定,使其頭部向下懸掛,動物在該環境中掙扎,企圖擺脫該困境,在經過努力仍無法擺脫后,出現間斷性不動,顯示“行為絕望”狀態。動物在該環境中拼命掙扎試圖逃跑又無法逃脫,從而提供了一個無可回避的壓迫環境,一段時間的實驗后,記錄處于該環境的動物產生絕望的不動狀態過程中的一系列參數,動物的表現出的這種典型的“不動狀態”,反映了一種被稱之為“行為絕望狀態”,這種行為絕望模型類似,而且對絕大多數抗抑郁藥wu敏感,而且其藥效與臨床藥效顯著相關,所以被廣泛用于抗抑郁藥wu的初選。


二、實驗方法及注意事項


正確的懸尾實驗該怎么做?搜索一下網頁,看到實驗者更關注一些細節問題,如:怎么懸掛?用什么懸掛?空間多少合適?距離底面多少?小鼠攀爬尾巴怎么解決等問題!如何避免老鼠疼痛引起不適?我們今天在這里討論一下!供大家參考:


  1. TST 懸尾實驗不建議用較重的大鼠,因為大鼠只能通過它們的尾巴來支持它們的體重,這對大鼠來說是痛苦的。同樣的道理,應該注意避免使用異常重的小鼠(例如用于模擬肥胖的小鼠),在這種情況下,實驗者應該尋找替代性的測試,例如強迫游泳實驗。

  2. 動物從居住環境帶入實驗環境應適應一段時間,通常至少一個小時。

  3. 實驗環境應保持安靜,突然大的噪音會使小鼠驚慌失措。

  4. 使用軟件分析時,選擇*佳對比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產的帶背光板的專業懸尾實驗設備;對老鼠的顏色沒有要求,更可拍攝出高質量,高對比度的實驗錄像。

  5. 每只小鼠的實驗空間多大?參考空間在 55 高*15 寬*11.5 cm 左右,多通量實驗時,為防止動物彼此觀察或互相影響,中間用隔板隔開;動物懸掛在隔間中間,寬度和深度足夠大,不能與墻壁接觸。

  6. 懸掛后動物鼻尖與設備地板之前的距離多少?參考距離在 20~25 cm 左右。

  7. 底部建議放置一個可拆卸的拖盤,收集糞便或尿液。

  8. 懸掛用的膠帶應牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上,并且足夠堅固以承受正在測試的小鼠的重量。但是,膠帶不應該過于粘滯,因為在實驗結束會從尾部移除。膠帶尺寸應統一,長度 17 厘米,從一端 2 厘米做標記。這個 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部,而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠;膠帶應貼在尾部的尾端,尾部留 2-3 毫米的距離。

  9. 尾巴攀爬阻止器,小鼠在實驗過程,會出現追求和攀爬它們自己的尾巴的現象,這是個普遍的問題。解決方法很簡單,而且非常有效:將一段塑料管切成 4 cm 長中空圓柱體(內徑 1.3 cm 左右,1.5 g)放置在小鼠尾巴周圍就能防止這種尾巴爬行行為。注意的是,在沒有使用阻止器之前,已經成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應將這類小鼠排除。

  10. 分析時僅有前肢但沒有后肢介入的小動作可判斷為不動;因慣性產生的擺動可判斷為不動;

  11. 上海欣軟信息科技有限公司推出的Super系列行為學 Tail Suspension 分析軟件(SuperTst懸尾軟件)可識別動物的多體位輪廓特征,準確區分并識別出活動和不動行為。

    上海欣軟官網:m.hnqfhb.com,電話:400-833-6811

  12. 實驗結束后(通常是 6 分鐘),將動物放回鼠籠,應輕輕將膠帶從尾巴上拉下來,不要從尾巴上撕扯膠帶,避免給動物帶來痛苦;

  13. 清潔用品,每次實驗完成,收集糞便和尿液,徹底擦拭懸掛盒。

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